Kožní biopsie – odběr a zasílání
Vybavení
Lokální anestetikum (2% mesocain, lidocain), jehla, stříkačka, jednorázový skalpel, kožní bioptický průbojník (punch biopsy – 4, 6 a 8 mm v průměru), oftalmologická pinzeta, nůžky, jehelec, šicí materiál, výsušky, 10% neutrální pufrovaný formalín pro rutinní histopatologii. Pozor na použití 2% lidokainu u koček – maximální bezpečná dávka je cca 0,5-0,75 ml pro 4 kg kočku, lze zředit 1:1 s fyziologickým roztokem (u psů cca 1 ml / 4 kg váhy).
Výběr místa biopsie
Výběru léze věnujte zvýšenou pozornost a při odběru vzorku dodržujte následující podmínky:
- Je nutno zvolit nejreprezentativnější léze, odběr je vhodné provést z více míst, jež reprezentují vývoj onemocnění. Vždy je nutno se zaměřit zejména na primární léze
- Pokud je léze malá, umístěte ji doprostřed bioptátu
- Bioptát by měl vždy obsahovat co nejméně zdravé kůže
- Pokud je léze větších rozměrů, odeberte reprezentativní vzorek z oblasti, která vykazuje nejméně sekundárních změn jako výraznou ulceraci, exkoriaci apod.
- Vždy se snažte, aby nejreprezentativnější část léze byla uprostřed bioptátu
- Nikdy neodstraňujte krusty, hyperkeratózy, „nečistoty“ apod., reprezentují vývoj onemocnění a často mohou být jedinou diagnostickou tkání…
Provedení odběru (ilustrační video zde)
- Místo biopsie se nesmí holit (k odstranění srsti lze použít strojek nebo nůžky) a dezinfikovat, lokální anestetikum je nutno striktně aplikovat subkutánně. Veškeré manipulace před odběrem (dezinfekce, holení, odstranění strupů atd.) způsobují vznik artefaktů a následující potíže při vyhodnocení.
- Počet bioptátů – obecně čím více, tím lépe. Racionální přístup reprezentují minimálně 2–3 bioptáty, ideálně 3–5.
- Velikost biopsie – musí být reprezentativní. Záleží na procesu a na způsobu odběru. Rozlišují se dva typy odběru: kruhový – „punch“ (kruhovitý pomocí bioptického průbojníku, většinou o průměru 6 mm) a incizní – „wedge“ (incizní biopsie pomocí skalpelu – vytvoří se elipsovitý či rhomboidní tvar). Kruhová biopsie se provádí u většiny suspektně zánětlivých kožních onemocnění, kdy je nutno odebrat vzorek ze středu reprezentativní léze. Incizní biopsie se provádí zejména u susp. neoplastických procesů, ulcerativních procesů nebo u velkých procesů, kde je nutno zhodnotit přechod normální a změněné kůže z hlediska invazivity procesu, a provádí se na přechodu léze a normální kůže (2/3 léze, 1/3 normální kůže). Třetím typem je excizní biopsie, která se provádí zejména u neoplastických a suspektně neoplastických procesů, při které se odstraní celý útvar.
- Vlastní odběr se provádí ve většině případů v lokální anestézii – anestetikum je nutno aplikovat přísně subkutánně (při intrakutánní aplikaci dochází k výraznému edému a vzniku artefaktů). Při odběru bioptickou jehlou je nutno kroužit jehlou jen v jednom směru, jinak se zvyšuje riziko vzniku artefaktů. S bioptátem je nutno manipulovat maximálně opatrně, neboť kůže je velmi náchylná ke vzniku artefaktů. Při odstřihování vykrouženého bioptátu od podkoží je nutno uchopit vzorek za podkoží, nadzvednout a odstřihnout. V žádném případě se nesmí pinzetou zmáčknout přímo kůže.
- Bioptát je nutno fixovat v 10% neutrálním pufrovaném formalínu. Doba fixace u 6mm bioptického vzorku před možností dalšího zpracováním je 24 hodin. Pokud se vzorky posílají v zimě, je nutno je chránit před zmrznutím (formalín mrzne téměř stejně jako voda). K zabránění zmrznutí (a tím zničení bioptátu) je vhodné v zimních měsících přidat do formalínu 95% etanol v poměru 1 díl etanolu a 9 dílů formalínu. Celkový objem formalínu by měl být 10–20x vyšší než je objem odebrané tkáně.
- Odeslání vzorku – vzorek je nutno odeslat k veterinárnímu dermatologovi / dermatopatologovi (není vhodné odesílat k humánnímu patologovi, neboť normální struktura kůže zvířat a člověka je odlišná, není vhodné odesílat k všeobecnému veterinárnímu patologovi s výjimkou kožních neoplazií – dermatohistopatologie jiných než neoplastických změn vykazuje výrazná specifika a ke stanovení diagnózy nebo diferenciálních diagnóz je více než vhodné použít expertízu klinického dermatologa).
- Se vzorkem je nutno odeslat bazální anamnézu a klinický nález, je nutno popsat dobu trvání, distribuci a lokalizaci lézí, přítomnost pruritu, dosud provedenou léčbu a úspěchy léčby, dosud provedená laboratorní vyšetření a vlastní diferenciální diagnostiku. Zapotřebí je též popis místa odběru. Tyto informace výrazně napomohou histopatologovi v diagnostice. Při odesílání vzorků ke mně, prosím vyplňujte mou žádanku – Dermatopatologická průvodka / žádanka zde.
K umožnění dermatopatologické korelace je vhodné současně se vzorkem zaslat i klinické fotky pacienta a reprezentativních lézí. Zasílat lze na CD, USB nebo e-mailem na vetderm.rybnicek@gmail.com (velikost všech souborů v jednom mailu nesmí překročit 5 MB). - Zabalení a zasílání vzorků: Vzorky zasílejte v těsnících odběrovkách, tyto je potřeba zabalit do buničité vaty a plastového uzavíratelného sáčku, aby v případě prasknutí nedošlo k vytékání formalínu z balíčku. Vhodnější je zaslání v kartonové krabičce (balíček) než v „polstrovaných“ obálkách. Prosím zasílejte vzorky přímo na uvedenou adresu spolu s mou žádankou. Laboratoř mi vzorky pouze zpracovává a dodává mi hotová sklíčka k odečítání.
Správně zabalené vzorky doporučuji zasílat kurýrními službami (GLS, DPD, PPL apod.). Českou poštu NEDOPORUČUJI, a to vzhledem k opakovaným problémům s doručením a velmi dlouhým doručovacím dobám (často 2-3 týdny!!! od podání zásilky). Vzorky zasílejte do laboratoře na adresu:
HISTOS s.r.o.
Zábrdovická 15/16a,
615 00 BRNO
Telefon: 605 397 342, e-mail: info@histos.cz
Bližší informace k doručení naleznete na stránce Cena a adresa.